Generell information

Neuroblastom (i perifera nervsystemet) och medulloblastom (i centrala nervsystemet) är de två vanligaste maligna cancertumörerna hos barn. Ett antal genetiska förändringar har identifierats i dessa tumörer. Nuvarande behandlingsregimer kan ge bot men är inte alltid framgångsrika eller ger svåra biverkningar. Syftet med aktuellt projekt är att med hjälp av genetiskt modifierade musmodeller efterlikna dessa tumörformer. Detta i avsikt att bättre förstå tumörers uppkomst och utveckling samt för att utveckla nya terapiformer.

Möss som överuttrycker en human onkogen (Th-MYCN) i sympatiska nervceller har använts. Dessa möss utvecklar spontant tumörer, oftast kring binjuren, vilka har stora likheter med barntumörerna avseende morfologi och kromosomförändringar. Tumörutvecklingen följs med palpation och olika imagingmetoder, samt behandlas med olika läkemedelskandidater.

Projektet klassificerades vara av avsevärd svårhetsgrad och vid utvärdering i efterhand ska frågorna ”hur många djur som faktiskt ingick i försöket samt hur många som uppnådde avbrytningspunkten” besvaras.

Antal sökta djur och antal använda djur

Tillståndet omfattade 30 000 möss. 3292 möss användes i försök. Ett flertal transgena musstammar respektive korsningar av dessa ingick i tillståndet. Endast Th-MYCN, en modell för neuroblastom, har använts. Heterozygota (+/-) Th-MYCN används som avelsdjur. Dessa kan utveckla tumörer och klassas därför som skadlig fenotyp och ingår i angivet antal över använda djur. Avelsdjur utan skadlig fenotyp ingår inte.

Bedömning av svårhetsgrad

Både den regionala nämnden och försöksledaren har klassificerat projektet med ”avsevärd svårhetsgrad”. Endast 2% (n=77) uppnådde i retrospektiv avsevärd svårhetsgrad då de uppvisat symptom av sin tumör eller biverkningar av behandling som påverkat hälsan avsevärt. Majoriteten (82%) av mössen klassificerades såsom ”ringa”. Merparten av dessa var avelsdjur som avlivats då de utvecklat en palpabel tumör utan symptom. Övriga möss var av måttlig (13%) eller terminal (3%) svårhetsgrad. Möss klassificerade med måttlig svårhetsgrad har uppvisat milda symptom och/eller genomgått farmakologisk behandling.

32 möss uppnådde avbrytningspunkten. Flertalet av dessa p.g.a. symptom från tumörbörda (förlamning efter tryck på ryggmärgen eller påverkad andning p.g.a. thoraxtumör). Andra orsaker är blödning från tumör eller behandlingsbiverkningar. Avbrytningspunkt: 0,6 poäng eller högre, enligt KI:s veterinärplan för bedömning av djurens fysiska och psykiska välbefinnande.

Måluppfyllelse

Försöksledaren bedömer att syftet delvis har uppnåtts, vissa frågeställningar har besvarats men behovet av ny kunskap för att bättre förstå och framgångsrikt behandla dessa tumörer kvarstår.

De viktigaste resultaten från aktuellt projekt:

• läkemedel av typen DHODH-hämmare kan bota neuroblastom hos möss, om de ges tillsammans med cellgifter. Detta grundar för kliniska prövningar av kombinationsbehandlingen.
• läkemedel som hämmar Rho-kinas potentierar effekten av en annan typ av läkemedel, så kallade BET-hämmare, vilka är i klinisk prövning mot bland annat neuroblastom.
• tumörer från Th-MYCN-modellen på singelcell-nivå har visat att tumörmodellen är en mycket relevant modell för neuroblastom då den efterliknar den humana sjukdomen. Ex vivo-tumörer från mustumörer i form av odlade tumörceller i matrix har kunnat etableras med bibehållen tumörbiologi.

Två artiklar har publicerats och två är under revision i välrenommerade internationella tidskrifter. Resultaten ingår också i en doktorsavhandling.

3R

Inget nytt avseende 3R har framkommit.

Åtgärder för att minska negativa effekter för djuren inkluderar användning av mjuk sond vid gavage och extra miljöberikning. Vidare har introduktion av ett extra näringsrikt foder visat sig förbättra överlevnaden för nyfödda musungar.

Inom projektet har man även etablerat organoider odlade från tumörer från Th-MYCN-modellen. Dessa organoider bibehåller bättre uttrycket av relevant neurala markörer, till skillnad från tidigare etablerade cellinjer. På sikt kan organoider troligen minska antalet djur inom tumörmodellen.

Övriga kommentarer

-

Etablerad rapportstandard