Generell information

Studien utforskade kopplingen mellan nervceller i nervcellsnätverk samt emotionella och motoriska funktioner.

Uppgifter som enligt beslut av den regionala djurförsöksetiska nämnden ska beaktas/besvaras vid utvärderingen av djurförsök i efterhand.

1. Hur har planeringen gjorts för att minimera negativ påverkan på djuren i studien?
   Svar: Tre veckor efter operationen och före det första beteendetestet hanterades alla möss och vande sig vid experimentrummet samt de optiska kablarna för att minska stressen under experimentdagen. Innan varje beteendetest acklimatiserades mössen i 30 minuter i experimentrummet. Flera olika substanser injicerades inte i samma djur. När ett djur hade erhållit en substans under det antal dagar som analysen med denna substans krävde, var försöket terminalt. Det innebar att endast en substans användes per djur, med maximalt en injektion per dag. För tester som varade kortare än en dag tilläts 24 timmars vila innan nästa test genomfördes. För tester som varade längre än en dag men högst fem dagar tilläts djuret minst tre dagars vila innan nästa experiment kunde utföras. Om ett test varade längre än fem dagar tilläts musen minst sju dagars vila innan nästa paradigm påbörjades.
2. Har eventuella 3R-förbättringar inneburit att färre djur använts?
   Svar: Vi begränsade antalet djur genom att samma djur genomgick flera beteendeanalyser utan att det blev alltför betungande för varje enskilt djur. Detta minskade det totala antalet djur som krävdes för varje försök. Vi begränsade också antalet tester genom att välja de som var mest relevanta för hypotesen.
3. Har ni övergått från att lyfta mössen i svansen till att använda en icke-aversiv hantering av dem och i så fall vilken?
   Svar: Vid djuranläggningen lyftes mössen fortfarande i svansen vid rutingrepp, såsom burbyten. Inför beteendetesterna habituerades dock djuren försiktigt till att stanna på handflatan. Denna icke-aversiva hantering infördes för att minimera stress och säkerställa mer tillförlitliga beteendemätningar under experimenten.
4. Hur har användning av CNO eller alternativt medel påverkat mössen?
   Svar: Denna procedur användes inte under experimenten och ersattes helt av optogenetik.
5. Hur många djur och vilken andel av testade lärde sig inte att självadministrera belöning genom att trycka med nos eller på pedal och avlivades därför?
   Svar: Cirka 10 % av djuren exkluderades från Sugar-PR-testet eftersom de antingen inte uppnådde en stabil självadministrering (n = 8) eller gjorde för många nos-pokes under de första sessionerna (n = 4), men de användes fortfarande i andra beteendetester inom testbatteriet.
6. Har ni haft kontinuerlig uppföljning av att det som gjorts överensstämmer med vad som angivits i ansökan, kompletteringar till denna och i nämndbeslut?
   Svar: Ja, kontinuerlig uppföljning har genomförts för att säkerställa att alla procedurer utförts i enlighet med ansökan, eventuella kompletteringar och nämndens beslut.
7. Har studien i sin helhet eller i vissa delar uppnått sitt syfte?
   Svar: Studien har uppnått sina syften, både i sin helhet och i de specifika delar som undersökts.

Antal sökta djur och antal använda djur

Ansökan rörde 10 000 djur, 1 724 användes.

Bedömning av svårhetsgrad

Alla delar av försöket genomfördes inte och endast få djur bedömdes som avsevärd svårhetsgrad. De flesta var ringa eller måttlig.

Måluppfyllelse

Försöket ledde till upptäckten att nervceller i den subtalamiska kärnan kan ge upphov till aversion om de stimuleras med optogenetik, som är ett sätt att härma nervsignalering. Det kan förklara depression och ångest i exempelvis Parkinsons sjukdom, där den subtalamiska kärnan är överaktiv.

3R

Genom att optimera antalet försök för varje enskilt djur har färre djur använts totalt och antalet försök minskat för varje djur. När tillräckligt mycket kunskap erhållits om hjärnans emotionella och motoriska system borde Machine Learning kunna användas i större utsträckning för att predicera funktioner; denna studie bör bidra till detta genom de nya hjärnfunktioner som identifierats.

Övriga kommentarer

Studien ledde till två publikationer i refereegranskade tidskrifter.

Etablerad rapportstandard