Generell information

Studiernas syfte var att söka kunskap om hur genetiska förändringar påverkar djuren fysiologiskt samt identifiera förväntade effekter och sidoeffekter av olika genförändringar och behandlingar. Tidig karaktärisering av djurmodeller som ska användas i läkemedelsutveckling ger viktig vägledning inför val av modell innan större studier inleds.

Testerna som utfördes inkluderade kliniska observationer, diet, behandling (oral tillförsel eller injektion av olika läkemedelsubstanser), ämnesomsättningsmätning, kroppssammansättning, toleranstest (glukos/insulin), beteendestudier (mäter t.ex. aktivitet, minne, ångest, rädsla och depression), funktionsstudier (lungor, hjärta och blodtryck), avbildningar (ultraljud, MRI och CT), balans och rörelsemätningar (rotarod och löpband) samt blodprovstagning. Planerad försökstid var från 20 veckor och upp till 18 månader. Vilka behandlingar och tester som utfördes har varierat beroende på de blivande läkemedlens förväntade effekter. I samband med ämnesomsättningstest ensamhölls möss. Mushanar som används i dessa studier ensamhölls kontinuerligt för att undvika slagsmål.

Utöver grundansökan så beviljades tre tillägg enligt följande:

• Tillägg 1: Tillägg av diet med extra näringsämnen till exempel tillskott av aminosyror. Dieten kan ges direkt vid avvänjningen.
• Tillägg 2: Ansökan avser tillägg av ett minnestest för igenkänning av föremål. Denna test kommer att jämföras med minnes/inlärningstest där musen kan få en lätt elektrisk stöt. Efter jämförelse med minnestest för igenkänning av föremål kommer minnes/inlärningstestet väljas bort. Mus kommer också få 1-2% sockerlösning istället för bara 1% sockerlösning.
• Tillägg 3: Ändring avser nya metoder för mätning av kroppsamansättning mha quantitative nuclear magnetic resonance (qNMR) som anses vara mindre stressfullt för djuret samt ny metod för blodtrycksmätning mha manschett vid svansrot. Ändringen bedöms inte påverka svårhetsgraden på befintlig grundansökan.

Antal sökta djur och antal använda djur

Tillståndet medgav användning av 2000 djur. 704 användes i försöken. Avel fanns med i ansökan, men inga djur användes i avel.

Bedömning av svårhetsgrad

5 djur nådde avsevärd svårhetsgrad, 581 djur nådde måttlig svårhetsgrad och 118 djur nådde ringa svårhetsgrad.

De fem djur som uppnått avsevärd svårhetsgrad användes i olika delstudier. Två av dessa möss visade sig vid avlivning ha spontant uppkomna tumörer. En mus avlivades på grund av skador från ett bitsår. En mus dog plötsligt och av oklar anledning under en subkutan injektion av saltlösning och för en mus saknas dokumentation om symptom och dödsorsak.

Totalt avlivades 26 möss p.g.a. uppnådd avbrytningspunkt: 14 möss avlivades p.g.a. kliande sår efter en lång tids utfodring med högfettsdiet. 8 möss (vildtypshannar) avlivades vid 2,5–5 månaders ålder p.g.a. spontant uppkomna abscesser som påverkade mössens förmåga att urinera.

3 möss avlivades vid 4–9 månaders ålder p.g.a. nedsatt allmäntillstånd såsom stillasittande och kutryggig position. Vid obduktion hittades en spontant uppkommen tumör i magen på en av dem (en icke-genmodifierad mus). Ingen tydlig orsak till det försämrade allmäntillståndet hittades för de andra två.

1 kontrollmus avlivades vid 12 månaders ålder p.g.a. stereotypt beteende.

Måluppfyllelse

25 nya genförändrade musmodeller inom forskningsområdena hjärta/kärl, njure/ämnesomsättning och respiration/inflammation karaktäriserades. Den ökade förståelsen för hur specifika gener kan påverka fysiologi och beteende kommer att användas vid läkemedelsutveckling mot specifika målmolekyler.

3R

Nytt system (Promethion Core system) infördes för att mäta ämnesomsättning i hemburar, med strö och bobyggnadsmaterial under hela mätperioden. Dessa burar kräver fortfarande ensamhållning, men är större, ger mer stimulans och lägre stress jämfört med de tidigare burarna. De har också en inbyggd våg som musen kan frivilligt hoppa upp i för automatisk vägning. Djurens välbefinnande ökade när ämnesomsättning mättes i hembur-miljö jämfört med när ämnesomsättningen mättes i burar utan berikning. Mössen fick inte heller en initial viktminskning vid burbyte, vilket var fallet vid burbyte med de tidigare burarna.

Försök gjordes för att ersätta minnestestet där elektrisk ström används som negativt stimuli, med minnestester där mössen får undersöka stillastående föremål i en bur och tester om musen kan skilja mellan ett välbekant och ett nytt föremål. Minnestestet är mindre stressande för djuren, men mäter samma typ av minne (mäter rumsminne jämfört med rädslominne). Det var enligt försöksledaren också svårare att få ett protokoll som fungerar med det senare testet då det finns många faktorer som påverkar rumsminnet. Nya föremål var inte alltid intressanta nog för att kontrollmössen skulle reagera på dem och då var det svårt att jämföra och uppmäta eventuell försämring av minnet hos försöksgruppen. Det gamla minnestestet har därför bara delvis kunnat ersättas.

Övriga kommentarer

-

Etablerad rapportstandard